请问分子生物学实验室一般有哪些注意事项?请问分子生物学实验室一般有哪些注意事项?
1、请问分子生物学实验室1般有哪些注意事项?
分子生物学操作中会涉及1系列仪器,使用不当导致实验失败、减少仪器使用寿命或损坏仪器。因此在进行操作前细致地了解各种仪器的使用方法及注意事项,是使后继实验事半功倍的1个必要准备。 冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中,都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机已成为分子生物学研究中必需的重要工具。 使用方法: 1.离心机应放置在水平坚固的地板或平台上,并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。 2.打开电源开关,按要求装上所需的转头,将预先以托盘天平平衡好的样品放置于转头样品架上(离心筒须与样品同时平衡),关闭机盖。 3.按功能选择键,设置各项要求:温度、速度、时间、加速度及减速度,带电脑控制的机器还需按储存键,以便记忆输入的各项信息。 4.按启动键,离心机将执行上述参数进行运作,到预定时间自动关机。 5.待离心机完全停止转动后打开机盖,取出离心样品,用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁,待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。 注意事项: 1.机体应始终处于水平位置,外接电源系统的电压要匹配,并要求有良好的接地线。 2.开机前应检查转头安装是否牢固,机腔有无异物掉入。 3.样品应预先平衡,使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。 4.挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的离心管,并确保液体不外漏,以免腐蚀机腔或造成事故。 5.擦拭离心机腔时动作要轻,以免损坏机腔内温度感应器。 6.每次操作完毕应作好使用情况记录,并定期对机器各项性能进行检修。 7.离心过程中若发现异常现象,应立即关闭电源,报请有关技术人员检修。 附:相对离心力与每分钟转速的换算 离心机的转速,在以前实验资料中1般以每分钟多少转来表示。由于离心力不仅为转速函数,亦为离心半径的函数,即转速相同时,离心半径越长,产生的离心力越大。因此仅以转速表达离心力是不够科学的,近年来主张用相对离心力(RCF)来表示比较合理。现在国际资料中,已改用相对离心力来表示。 两者的互换公式如下: PCR扩增仪: 目前各公司提供的PCR仪操作方法各有不同,按其操作说明进行操作。 值得提出的是,在使用1定时期后,样品孔的实际温度与仪器显示温度有时会有较大差异,应当请厂商的技术支持人员校对仪器的各项性能。 数字式酸度计:
1、 准备工作 1.仪器应平放在符合使用环境的工作台上,依视觉角度支起支架。 3.pH值的定位测量法: (1)2点定位法(高精度测量方法) (1) 连接好电极线路,将参比电极及活化满24h以上清洁的PH电极移入第1标准缓冲液pH1中(例pH1=4.00),待仪器响应稳定后,调节定位旋钮至仪器显示为“0.00”; (2) 将电级系统从第1种标准液中取出,用去离子水冲洗干净后以滤纸吸干电级表面水份,移入第2种标准液(例pH2=9.18)中,仪器响应稳定后,调节斜率旋钮,使仪器显示为(△pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18)此后斜率旋钮不可再动,除非更换电极系统; (3) 斜率调节完成后,重新调节定位旋钮,使仪器显示第2种标准液的实际pH值(9.18),至此2点定位结束; (4) 将电极从第2种标准液中取出冲洗、吸干后移入待测溶液中,仪器响应稳定后显示的数值即为待测溶液的pH值。 (2)1点定位法(粗略测量法) (1) 将温度补偿旋钮调至溶液温度值; (2) 向左将斜率补偿旋钮旋转至头; (3) 将电级系统移入标准液中(1点法仅用1种标准液,如pH=4.00时),调节定位旋钮使仪器显示“4.00”; (4) 取出电级冲洗吸干水分后移至待测溶液中,仪器响应稳定后显示的数值即为待测溶液的pH值。
3、温度的测量 1.将功能选择拨至温度档。 2.将温度探头插入插孔,并将温度探头置于环境条件或溶液中,仪器响应稳定后仪器显示值即为环境条件或溶液温度值。
4、注意事项 1.认真做好仪器使用前准备工作。 2.仪器通电后或测量过程中出现显示不稳或乱跳现象,应切断电源进行检查,如电压、预热时间及电极系统等是否正常。 3.使用不同电极应注意排除离子的干扰,选择好盐桥,必要时应使用离子强度固定剂。 4.电极系统从第1种溶液取出移入第2种溶液之前,须用。
2、请问分子生物学实验室1般有哪些注意事项?
分子生物学操作中会涉及1系列仪器,使用不当导致实验失败、减少仪器使用寿命或损坏仪器。因此在进行操作前细致地了解各种仪器的使用方法及注意事项,是使后继实验事半功倍的1个必要准备。 冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中,都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机已成为分子生物学研究中必需的重要工具。 使用方法: 1.离心机应放置在水平坚固的地板或平台上,并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。 2.打开电源开关,按要求装上所需的转头,将预先以托盘天平平衡好的样品放置于转头样品架上(离心筒须与样品同时平衡),关闭机盖。 3.按功能选择键,设置各项要求:温度、速度、时间、加速度及减速度,带电脑控制的机器还需按储存键,以便记忆输入的各项信息。 4.按启动键,离心机将执行上述参数进行运作,到预定时间自动关机。 5.待离心机完全停止转动后打开机盖,取出离心样品,用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁,待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。 注意事项: 1.机体应始终处于水平位置,外接电源系统的电压要匹配,并要求有良好的接地线。 2.开机前应检查转头安装是否牢固,机腔有无异物掉入。 3.样品应预先平衡,使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。 4.挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的离心管,并确保液体不外漏,以免腐蚀机腔或造成事故。 5.擦拭离心机腔时动作要轻,以免损坏机腔内温度感应器。 6.每次操作完毕应作好使用情况记录,并定期对机器各项性能进行检修。 7.离心过程中若发现异常现象,应立即关闭电源,报请有关技术人员检修。 附:相对离心力与每分钟转速的换算 离心机的转速,在以前实验资料中1般以每分钟多少转来表示。由于离心力不仅为转速函数,亦为离心半径的函数,即转速相同时,离心半径越长,产生的离心力越大。因此仅以转速表达离心力是不够科学的,近年来主张用相对离心力(RCF)来表示比较合理。现在国际资料中,已改用相对离心力来表示。 两者的互换公式如下: PCR扩增仪: 目前各公司提供的PCR仪操作方法各有不同,按其操作说明进行操作。 值得提出的是,在使用1定时期后,样品孔的实际温度与仪器显示温度有时会有较大差异,应当请厂商的技术支持人员校对仪器的各项性能。 数字式酸度计:
1、准备工作 1.仪器应平放在符合使用环境的工作台上,依视觉角度支起支架。 3.pH值的定位测量法: (1)2点定位法(高精度测量方法) (1)连接好电极线路,将参比电极及活化满24h以上清洁的PH电极移入第1标准缓冲液pH1中(例pH1=4.00),待仪器响应稳定后,调节定位旋钮至仪器显示为“0.00”; (2)将电级系统从第1种标准液中取出,用去离子水冲洗干净后以滤纸吸干电级表面水份,移入第2种标准液(例pH2=9.18)中,仪器响应稳定后,调节斜率旋钮,使仪器显示为(△pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18)此后斜率旋钮不可再动,除非更换电极系统; (3)斜率调节完成后,重新调节定位旋钮,使仪器显示第2种标准液的实际pH值(9.18),至此2点定位结束; (4)将电极从第2种标准液中取出冲洗、吸干后移入待测溶液中,仪器响应稳定后显示的数值即为待测溶液的pH值。 (2)1点定位法(粗略测量法) (1)将温度补偿旋钮调至溶液温度值; (2)向左将斜率补偿旋钮旋转至头; (3)将电级系统移入标准液中(1点法仅用1种标准液,如pH=4.00时),调节定位旋钮使仪器显示“4.00”; (4)取出电级冲洗吸干水分后移至待测溶液中,仪器响应稳定后显示的数值即为待测溶液的pH值。
3、温度的测量 1.将功能选择拨至温度档。 2.将温度探头插入插孔,并将温度探头置于环境条件或溶液中,仪器响应稳定后仪器显示值即为环境条件或溶液温度值。
4、注意事项 1.认真做好仪器使用前准备工作。 2.仪器通电后或测量过程中出现显示不稳或乱跳现象,应切断电源进行检查,如电压、预热时间及电极系统等是否正常。 3.使用不同电极应注意排除离子的干扰,选择好盐桥,必要时应使用离子强度固定剂。 4.电极系统从第1种溶液取出移入第2种溶液之前,须用去离子水或双蒸水清洗干净,再用滤纸吸干表面水分,以免影响测定结果的准确性。 5.仪器应存放于干燥、清洁无腐蚀的场所,每次测量结束后应关闭电源,退出电极及温度探头妥善保存。玻璃电极清洗后可浸于去离子水待用(注意水面不得低于玻璃球泡),甘汞电极清洁后套上橡皮帽置于配套盒中保存,当甘汞电极内充液泄漏或不饱和及盐桥中断时,应及时补充饱和内充液。 6.该类仪器均采用大规模集成电路,输入阻值较高,在对仪器内部进行任何0部件修理焊接时,应使用45W以下有良好地线的烙铁,无接地线烙铁应拨下电源插头焊接。 分光光度计 不同物质对不同波长入射光的吸收程度各不相同,从而形成特征性的吸收光谱。分光光度法不仅适应于可见光区,同时还可扩展至紫外光区及红外光区,因此给科研实验带来了极大方便。下面重点介绍分光光度计的使用及注意事项。 使用规则 1.接通稳压器电源,待稳压器输出电压稳定至200V后打开光度计电源,仪器自动进入初始化。 2.初始化约需时10min,内容包括:
1、寻找0级光;
2、建立基线;
3、最后当显示器指示××nm时,,表明仪器完成初始化程序,可进入检测状态。 3.按要求输入各项参数,选择相应比色杯(玻璃或石英),将空白管、标准管及待测管依次放入比色皿架内,关上比色池盖。 4.以空白管自动调0。 5.试样槽依次移至样品位置,待数据显示稳定后按“START/STOP”键,打印机自动打印所测数据,重复上述步骤,直到所有样品检测完毕。 6.检测结束后应及时取出比色杯,并清洗干净放回原处,同时关上仪器电源开关及稳压器电源开关,做好使用情况登记。 注意事项 1.仪器初次使用或使用较长时间(1般为1年),需检查波长准确度,以确保检测结果的可靠性。 2.由于长途运输或室内搬运可能造成光源位置偏移,导致亮电流漂移增大。此时对光源位置进行调整,直至达到有关技术指标为止。若经调整校正后波长准确度、暗电源漂移及亮电流漂移3项关键指标仍未符合要求,则应停止使用,并及时通知有关技术人员检修。 3.每次检测结束后应检查比色池内有否溶液溢出,若有溢出应随时用滤纸吸干,以免引起测量误差或影响仪器使用寿命。 4.仪器每次使用完毕,应于灯室内放置数袋硅胶(或其它干燥剂),以免反射镜受潮霉变或沾污,影响仪器使用,同时盖好防尘罩。 5.仪器室应通常保持洁净干燥,室温以5-35℃为宜,相对温度不得超过85%。有条件者应于室内配备空调机及除湿机,以确保仪器性能稳定。 6.仪器室不得存放酸、碱、挥发性或腐蚀性等物质,以免损坏仪器。 7.仪器长时间不用时,应定时通电预热,每周1次,每次30min,以保证仪器处于良好使用状态。 电泳仪: 电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳1般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等,分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,根据这1特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将1定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造的。下面简单介绍其使用方法及注意事项。 使用方法 1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接,注意极性不要接反。 2.电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小,根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 3.接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。 4.工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至0位或关闭状态,并拨出电泳插头。 注意事项 1.电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端,以防漏电。 2.仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。 3.由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同介质支持物的电泳不要同时在同1电泳仪上进行。 4.在总电流不超过仪器额定电流时(最大电流范围),可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响仪器寿命。 5.某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机,但在稳流状态下必须先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,容易造成不必要的人为机器损坏。 6.使用过程中发现异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立即切断电源,进行检修,以免发生意外事故。 分析天平: 分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要仪器,充分了解仪器性能及熟练掌握其使用方法,是获得可靠分析结果的保证。分析天平的种类很多,有普通分析天平、半自动/全自动加码电光投影阻尼分析天平及电子分析天平等。下面就电子分析天平的使用方法及注意事项做1介绍。 操作方法 1.检查并调整天平至水平位置。 2.事先检查电源电压是否匹配(必要时配置稳压器),按仪器要求通电预热至所需时间。 3.预热足够时间后打开天平开关,天平则自动进行灵敏度及0点调节。待稳定标志显示后,可进行正式称量。 4.称量时将洁净称量瓶或称量纸置于称盘上,关上侧门,轻按1下去皮键,天平将自动校对0点,然后逐渐加入待称物质,直到所需重量为止。 5.被称物质的重量是显示屏左下角出现“→”标志时,显示屏所显示的实际数值。 6.称量结束应及时除去称量瓶(纸),关上侧门,切断电源,并做好使用情况登记。 注意事项 1.天平应放置在牢固平稳水泥台或木台上,室内要求清洁、干燥及较恒定的温度,同时应避免光线直接照射到天平上。 2.称量时应从侧门取放物质,读数时应关闭箱门以免空气流动引起天平摆动。前门仅在检修或清除残留物质时使用。 3.电子分析天平若长时间不使用,则应定时通电预热,每周1次,每次预热2h,以确保仪器始终处于良好使用状态。 4.天平箱内应放置吸潮剂(如硅胶),当吸潮剂吸水变色,应立即高温烘烤更换,以确保吸湿性能。 5.挥发性、腐蚀性、强酸强碱类物质应盛于带盖称量瓶内称量,防止腐蚀天平。 2.通电前应按工作电源要求检查电压是否符合要求,若电源波动太大,应经交流稳压后再送接仪器。 3.电源应用良好接线,以消除外界干扰,使用搅拌器时,务必使搅拌器外壳与仪器接地端相连。 4.接通仪器电源,经10min预热后,可进行测量工作。
2、pH(酸碱度)测量 1.将功能选择拨至“pH”档,调节定位旋扭,斜率补偿旋钮及温度补偿旋钮显示值应有相应变化。 2.通过仪器温度档测定标准液及待测样品液温度(要求两种液体温度保持1致,以减少测定误差),并用温度补偿旋钮调节至溶液实际温度值。 楼主是做毕业论文吧,最好到学校图书馆先借几本这方面的书看看。
3、请问分子生物学实验室1般有哪些注意事项?
分子生物学操作中会涉及1系列仪器,使用不当导致实验失败、减少仪器使用寿命或损坏仪器。因此在进行操作前细致地了解各种仪器的使用方法及注意事项,是使后继实验事半功倍的1个必要准备。 冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中,都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机已成为分子生物学研究中必需的重要工具。 使用方法: 1.离心机应放置在水平坚固的地板或平台上,并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。 2.打开电源开关,按要求装上所需的转头,将预先以托盘天平平衡好的样品放置于转头样品架上(离心筒须与样品同时平衡),关闭机盖。 3.按功能选择键,设置各项要求:温度、速度、时间、加速度及减速度,带电脑控制的机器还需按储存键,以便记忆输入的各项信息。 4.按启动键,离心机将执行上述参数进行运作,到预定时间自动关机。 5.待离心机完全停止转动后打开机盖,取出离心样品,用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁,待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。 注意事项: 1.机体应始终处于水平位置,外接电源系统的电压要匹配,并要求有良好的接地线。 2.开机前应检查转头安装是否牢固,机腔有无异物掉入。 3.样品应预先平衡,使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。 4.挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的离心管,并确保液体不外漏,以免腐蚀机腔或造成事故。 5.擦拭离心机腔时动作要轻,以免损坏机腔内温度感应器。 6.每次操作完毕应作好使用情况记录,并定期对机器各项性能进行检修。 7.离心过程中若发现异常现象,应立即关闭电源,报请有关技术人员检修。 附:相对离心力与每分钟转速的换算 离心机的转速,在以前实验资料中1般以每分钟多少转来表示。由于离心力不仅为转速函数,亦为离心半径的函数,即转速相同时,离心半径越长,产生的离心力越大。因此仅以转速表达离心力是不够科学的,近年来主张用相对离心力(RCF)来表示比较合理。现在国际资料中,已改用相对离心力来表示。 两者的互换公式如下: PCR扩增仪: 目前各公司提供的PCR仪操作方法各有不同,按其操作说明进行操作。 值得提出的是,在使用1定时期后,样品孔的实际温度与仪器显示温度有时会有较大差异,应当请厂商的技术支持人员校对仪器的各项性能。 数字式酸度计:
1、准备工作 1.仪器应平放在符合使用环境的工作台上,依视觉角度支起支架。 3.pH值的定位测量法: (1)2点定位法(高精度测量方法) (1)连接好电极线路,将参比电极及活化满24h以上清洁的PH电极移入第1标准缓冲液pH1中(例pH1=4.00),待仪器响应稳定后,调节定位旋钮至仪器显示为“0.00”; (2)将电级系统从第1种标准液中取出,用去离子水冲洗干净后以滤纸吸干电级表面水份,移入第2种标准液(例pH2=9.18)中,仪器响应稳定后,调节斜率旋钮,使仪器显示为(△pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18)此后斜率旋钮不可再动,除非更换电极系统; (3)斜率调节完成后,重新调节定位旋钮,使仪器显示第2种标准液的实际pH值(9.18),至此2点定位结束; (4)将电极从第2种标准液中取出冲洗、吸干后移入待测溶液中,仪器响应稳定后显示的数值即为待测溶液的pH值。 (2)1点定位法(粗略测量法) (1)将温度补偿旋钮调至溶液温度值; (2)向左将斜率补偿旋钮旋转至头; (3)将电级系统移入标准液中(1点法仅用1种标准液,如pH=4.00时),调节定位旋钮使仪器显示“4.00”; (4)取出电级冲洗吸干水分后移至待测溶液中,仪器响应稳定后显示的数值即为待测溶液的pH值。
3、温度的测量 1.将功能选择拨至温度档。 2.将温度探头插入插孔,并将温度探头置于环境条件或溶液中,仪器响应稳定后仪器显示值即为环境条件或溶液温度值。
4、注意事项 1.认真做好仪器使用前准备工作。 2.仪器通电后或测量过程中出现显示不稳或乱跳现象,应切断电源进行检查,如电压、预热时间及电极系统等是否正常。 3.使用不同电极应注意排除离子的干扰,选择好盐桥,必要时应使用离子强度固定剂。 4.电极系统从第1种溶液取出移入第2种溶液之前,须用去离子水或双蒸水清洗干净,再用滤纸吸干表面水分,以免影响测定结果的准确性。 5.仪器应存放于干燥、清洁无腐蚀的场所,每次测量结束后应关闭电源,退出电极及温度探头妥善保存。玻璃电极清洗后可浸于去离子水待用(注意水面不得低于玻璃球泡),甘汞电极清洁后套上橡皮帽置于配套盒中保存,当甘汞电极内充液泄漏或不饱和及盐桥中断时,应及时补充饱和内充液。 6.该类仪器均采用大规模集成电路,输入阻值较高,在对仪器内部进行任何0部件修理焊接时,应使用45W以下有良好地线的烙铁,无接地线烙铁应拨下电源插头焊接。 分光光度计 不同物质对不同波长入射光的吸收程度各不相同,从而形成特征性的吸收光谱。分光光度法不仅适应于可见光区,同时还可扩展至紫外光区及红外光区,因此给科研实验带来了极大方便。下面重点介绍分光光度计的使用及注意事项。 使用规则 1.接通稳压器电源,待稳压器输出电压稳定至200V后打开光度计电源,仪器自动进入初始化。 2.初始化约需时10min,内容包括:
1、寻找0级光;
2、建立基线;
3、最后当显示器指示××nm时,,表明仪器完成初始化程序,可进入检测状态。 3.按要求输入各项参数,选择相应比色杯(玻璃或石英),将空白管、标准管及待测管依次放入比色皿架内,关上比色池盖。 4.以空白管自动调0。 5.试样槽依次移至样品位置,待数据显示稳定后按“START/STOP”键,打印机自动打印所测数据,重复上述步骤,直到所有样品检测完毕。 6.检测结束后应及时取出比色杯,并清洗干净放回原处,同时关上仪器电源开关及稳压器电源开关,做好使用情况登记。 注意事项 1.仪器初次使用或使用较长时间(1般为1年),需检查波长准确度,以确保检测结果的可靠性。 2.由于长途运输或室内搬运可能造成光源位置偏移,导致亮电流漂移增大。此时对光源位置进行调整,直至达到有关技术指标为止。若经调整校正后波长准确度、暗电源漂移及亮电流漂移3项关键指标仍未符合要求,则应停止使用,并及时通知有关技术人员检修。 3.每次检测结束后应检查比色池内有否溶液溢出,若有溢出应随时用滤纸吸干,以免引起测量误差或影响仪器使用寿命。 4.仪器每次使用完毕,应于灯室内放置数袋硅胶(或其它干燥剂),以免反射镜受潮霉变或沾污,影响仪器使用,同时盖好防尘罩。 5.仪器室应通常保持洁净干燥,室温以5-35℃为宜,相对温度不得超过85%。有条件者应于室内配备空调机及除湿机,以确保仪器性能稳定。 6.仪器室不得存放酸、碱、挥发性或腐蚀性等物质,以免损坏仪器。 7.仪器长时间不用时,应定时通电预热,每周1次,每次30min,以保证仪器处于良好使用状态。 电泳仪: 电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳1般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等,分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,根据这1特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将1定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造的。下面简单介绍其使用方法及注意事项。 使用方法 1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接,注意极性不要接反。 2.电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小,根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 3.接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。 4.工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至0位或关闭状态,并拨出电泳插头。 注意事项 1.电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端,以防漏电。 2.仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。 3.由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同介质支持物的电泳不要同时在同1电泳仪上进行。 4.在总电流不超过仪器额定电流时(最大电流范围),可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响仪器寿命。 5.某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机,但在稳流状态下必须先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,容易造成不必要的人为机器损坏。 6.使用过程中发现异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立即切断电源,进行检修,以免发生意外事故。 分析天平: 分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要仪器,充分了解仪器性能及熟练掌握其使用方法,是获得可靠分析结果的保证。分析天平的种类很多,有普通分析天平、半自动/全自动加码电光投影阻尼分析天平及电子分析天平等。下面就电子分析天平的使用方法及注意事项做1介绍。 操作方法 1.检查并调整天平至水平位置。 2.事先检查电源电压是否匹配(必要时配置稳压器),按仪器要求通电预热至所需时间。 3.预热足够时间后打开天平开关,天平则自动进行灵敏度及0点调节。待稳定标志显示后,可进行正式称量。 4.称量时将洁净称量瓶或称量纸置于称盘上,关上侧门,轻按1下去皮键,天平将自动校对0点,然后逐渐加入待称物质,直到所需重量为止。 5.被称物质的重量是显示屏左下角出现“→”标志时,显示屏所显示的实际数值。 6.称量结束应及时除去称量瓶(纸),关上侧门,切断电源,并做好使用情况登记。 注意事项 1.天平应放置在牢固平稳水泥台或木台上,室内要求清洁、干燥及较恒定的温度,同时应避免光线直接照射到天平上。 2.称量时应从侧门取放物质,读数时应关闭箱门以免空气流动引起天平摆动。前门仅在检修或清除残留物质时使用。 3.电子分析天平若长时间不使用,则应定时通电预热,每周1次,每次预热2h,以确保仪器始终处于良好使用状态。 4.天平箱内应放置吸潮剂(如硅胶),当吸潮剂吸水变色,应立即高温烘烤更换,以确保吸湿性能。 5.挥发性、腐蚀性、强酸强碱类物质应盛于带盖称量瓶内称量,防止腐蚀天平。 2.通电前应按工作电源要求检查电压是否符合要求,若电源波动太大,应经交流稳压后再送接仪器。 3.电源应用良好接线,以消除外界干扰,使用搅拌器时,务必使搅拌器外壳与仪器接地端相连。 4.接通仪器电源,经10min预热后,可进行测量工作。
2、pH(酸碱度)测量 1.将功能选择拨至“pH”档,调节定位旋扭,斜率补偿旋钮及温度补偿旋钮显示值应有相应变化。 2.通过仪器温度档测定标准液及待测样品液温度(要求两种液体温度保持1致,以减少测定误差),并用温度补偿旋钮调节至溶液实际温度值。 楼主是做毕业论文吧,最好到学校图书馆先借几本这方面的书看看。
4、请问分子生物学实验室1般有哪些注意事项?
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5、分子生物学实验室1般有哪些注意事项
目前,分子生物学飞速发展,分子生物学相关的理论和技术已深入到生命科学的各个领域,1些常用的技术,如基因组DNA的分离纯化,质粒DNA的抽提及纯化,RNA的提取,PCR扩增,Southern blot等成为分子生物学研究的强有力工具,为分子生物学的发展起了巨大的推动作用,然后,这些实验操作技术都涉及到氯仿、DEPC、同位素等有毒有害或具放射性的物质,对环境和人身安全也造成巨大的威胁。因此,弄清这些有害有毒物质的作用,加强实验室安全管理,建立良好的制度和处理,保证分子生物学实验室成为真正的科研阵地。 放射性物质的处理:放射性同位素技术具有灵敏、简便和廉价等优点,在分子生物学实验室应用普遍,但由于放射性同位素的辐射会给人体造成损伤,如果使用不当或操作不规范,会造成环境污染,甚至损伤人员。在进行同位素操作时1定要注意个人防护,包括使用隔离、专用衣帽手套及防护背心、挡板等。对放射性同位素的污染进行安全性教育,实行责任到人的做法,对放射性物质统1保管、集中存放、集中处理的做法。在定购同位素时,根据需要量进行订购。α-31p半衰期为14.5天,在southern blotting应用较广,是危害较大的放射性物质。DNA杂交时,在探针标记、洗膜等几个阶段都涉及同位素。对含α-31p固体废物,放入铁皮箱10个半衰期(约半年)后埋到指定的地点:对于含α-31p浓度较高的液体废物(如首次洗膜液),在厚实的朔料桶放置8个半衰期后倒入专用的下水道;含α-31p浓度较低的液体废物(如
2、3次洗膜液),则直接倒入专用的下水道。 4.3常见的有毒物质的处理:溴化乙锭、Trizol、丙烯酰氨、DEPC、甲酰氨等毒性高、环境危害大的物质,分类收集后统1处理。 4.3.1 EB(Ethidiunl bromide,溴化乙锭):EB是1种强烈诱变剂并有中度毒性,应戴手套操作,对于含有EB的溶液也不应直接倒下水道,用后妥善净化处理:EB含量大干0.5μg/ml溶液先用水将EB浓度稀释至0.5μg/ml以下,每100ml溶液加入100mg活性碳。不时轻轻摇荡混匀,室温放置1小时,滤纸过滤将活性碳与滤纸密封在塑料袋中作为有害废物丢弃。或用专用1次性染料清除袋(Gene有限公司)吸附过夜,再焚烧袋子即可。EB接触物,如抹布、枪头等埋入地下。 4.3.2 Trizol:提取组织和细胞RNA的1种重要试剂,在提取RNA时1定要在通风进行。如皮肤接触Trizol,请立即用大量去垢剂和水冲洗,废液埋入地下。 4.3.3 DEPC(Diethylprocarbonate,2乙基焦碳酸酯):RNA酶的强抑制剂,1种潜在的致癌物质。操作时戴口罩。在通风橱中进行。沾到手上立即冲洗,废液通过废液道排泄。 4.3.4 CHCl3(ChIoroform,氯仿):常用于DNA和RNA提取,对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有强烈的刺激作用和腐蚀性,易损害肝和肾。操作时戴手套在通风橱里进行,废液收集后埋入地下。 4.3.5 Acrylamide(丙烯酰胺):DNA测序、SSR及蛋白质分离等技术中作电泳支持物,具神经毒性,聚合后毒性消失。操作时戴手套在通风橱内进行,聚合后的聚丙烯酰胺凝胶没有毒性,可随普通垃圾1起扔掉,千万不要倒入下水道。